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色谱的类型及各自的特点

作者:互联网

色谱是一种分析技术,其原理是通过两相(固定相和流动相)分离样品中的组分。最初的色谱为柱色谱,但其应用和效率都非常有限。为了克服这一局限性,色谱结合了分离和检测样品成分的先进技术,多种色谱技术得以发展。

 

在本文中,小编将介绍几种色谱技术及它们各自的特点,希望能帮到大家。

 

1.柱色谱

柱色谱是使用最广泛的色谱法,通常用于实验室和工业研究。柱色谱操作简单,技术成本较低。如下图所示,有一根长长的柱子,借助一个架子悬在空中。将固定相填充进柱中,流动相从色谱柱顶部倒入,流经色谱柱中固定相上的样品,从而实现分离。

柱色谱分离原理图(图片来源:百度)

2. 高效液相色谱

高效液相色谱,又称为“近代柱色谱”,是色谱法的一个重要分支。其所使用的固定相由小颗粒组成,以增加表面积,提高分离速率,因此它被称为高效液相色谱。其原理与柱色谱相似。流动相携带混合物的组分以不同的速度通过色谱柱,其通过的速率取决于组分对流动相和固定相的相对亲和力。通过不同的检测器检测样品中的各组分,如紫外可见光检测器、蒸发光散射检测器或示差折光检测器等。大分子(如蛋白质、脂肪)、小分子(如单胺类)以及化学成分相似的物质(如单胺类、类固醇)都可以用高效液相色谱分析。高效液相色谱,应用范围广,应用于法医、药物、食品、临床、环境和生物技术等领域。

 

3.气相色谱

在气相色谱中,以气体作流动相,以固定液或固体吸附剂作固定相。根据混合物与流动相、固定相之间的相对亲和力,分离混合物的挥发性成分。由于固定相的数量有限以及仪器和操作程序相对昂贵,这种技术没有得到广泛的应用。但气相色谱对热稳定、易挥发、能气化的物质具有较好的检测效果。

 

4. 纸层析

纸层析,又称纸色谱,以一种特殊设计的滤纸作为固定相。滤纸中的纤维素层含有的水分作为固定相。缓冲液和其他溶剂用作流动相。分离的原理是相似相溶。纸色谱法可以分析的样品非常广。用毛细管或微量吸管将流动相中溶解的样品标记在滤纸上,然后将滤纸放入容器中,使其浸入溶剂中,于阴暗处进行层析,样品将在滤纸表面分离,然后对其形成的颜色进行识别。纸色谱可以分析碳水化合物、蛋白质、氨基酸、维生素、药物、糖苷、生物碱、血液和尿液等样品中的代谢物。

 

5. 薄层色谱(TLC)

薄层色谱,又称为薄层层析,以合适的溶剂作为流动相,以涂布在支持板上的支持物作为固定相。分离的原理是吸附。一个或多个样品涂在有薄层板上。如下图所示,该板部分浸入展开剂中,溶剂沿着吸附剂移动。样品组分随展开剂以不同的速率移动,这取决于它们对吸附剂的亲和力,从而实现组分分离。薄层色谱与纸色谱类似,可用于分析任何类型的样品,但通常用于分析植物提取物、药物、碳水化合物、蛋白质、抗生素、维生素等。

薄层色谱分离原理图(图片来源:迪信泰检测平台)

 

6. 离子交换色谱

离子交换色谱,用离子交换树脂作为固定相,主要用来分离带电离子的混合物。流动相中的组分离子与离子交换树脂(固定相)上的离子基团进行可逆交换,这种可交换的离子是阴离子或阳离子。如下式所示,

离子交换树脂-H+ + M+(流动相)----->树脂-M+ + H+(流动相)

 

流动相中带电荷的离子与固定相(离子交换树脂)中带电荷的离子发生离子互换。

流动相中带相反电荷的离子先从柱中洗脱出来,然后再用缓冲溶液将那些与离子交换树脂结合的分子洗脱出来。

 

本文由迪信泰检测平台(Biotech-Pack-Analytical)整理编辑。

 

迪信泰检测平台以液相/气相为依托,组建高效液相色谱HPLC、液相色谱-质谱LC-MS、气相色谱-质谱GC-MS等技术平台,致力于为各科研院所,高校,药企,生物工程类企业提供高效、准确、高性价比的小分子化合物检测技术包裹。

 

参考资料:10 Types of Chromatography | Based on Different Techniques & Methods.

标签:各自,色谱,样品,流动,分离,液相,固定,类型
来源: https://www.cnblogs.com/dxthplc/p/13685669.html